Оренбургский государственный университет

Биохемилюминесцентный метод оценки фагоцитоза и устройство для его осуществления

Разработан биохемилюминесцентный способ оценки фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови человека (положительное решение формальной экспертизы ФИПС по заявке на изобретение № 2007139351/15 от 23.10.2007), сущностью которого является раздельный учет интенсивности люминолзависимой хемилюминесценции фагоцитов и биолюминесценции бактериальных клеток-мишеней в фагоцитарной системе, проводимый в одной пробе путем оценки интенсивности свечения в двух различных дипазонах спектра (<430 нм при оценке хемилюминесценции и >540 нм при оценке биолюминесценции) или во всем спектральном диапазоне 380-600 нм, но в двух отдельных пробах, в одну из которых фагоцитируемые объекты вносят после дополнительной инкубации при 42°С в течение 10 минут (для подавления биолюминесценции), а в другую не вносят люминол (для исключения хемилюминесценции). При этом в качестве фагоцитируемых объектов используют рекомбинантные люминесцирующие бактерии Escherichia coli с клонированными luxCDABE генами Photobacterium leiognathii, предварительно опсонизированные нормальным иммуноглобулином человека.

Основным положительным результатом, достигаемым при использовании способа, является возможность комплексной оценки как уровня активации кислородзависимых бактерицидных систем фагоцитов (по показателям люминолзависимой хемилюминесценции), так и выраженности обусловленного их действием киллингового эффекта в отношении бактериальных клеток-мишеней (по показателям биолюминесценции), а также повышение точности проводимого исследования. Способ предназначен для использования в лабораториях биологического и медицинского профиля, решающих вопросы оценки иммунного статуса организма и уровня его противоинфекционной резистентности при различных физиологических и патологических состояниях.

Результаты работы в 2006 году