Оренбургский государственный университет

Биохемилюминесцентный метод оценки фагоцитоза и устройство для его осуществления

Обоснован оптимальный режим опсонизации рекомбинантных люминесцирующих клеток Escherichia coli с использованием нормального иммуноглобулина человека, не оказывающий существенного влияния на жизнеспособность и биолюминесценцию бактериальных клеток-мишеней, но достаточный для активации фагоцитирующих клеток.

Определена кинетика люминолзависимой хемилюминесценции фагоцитов и биолюминесценции бактерий в их смесях, характеризующаяся фазным повышением интенсивности первого и снижением второго анализируемого параметра.

Продемонстрирована пропорциональность между интенсивностью тушения биолюминесценции в смесях "бактерии: фагоциты" и долей бактериальных клеток-мишеней, в отношении которых в этих условиях развивается бактерицидный эффект.

На основании полученных данных разработан способ биохемилюминесцентной оценки фагоцитоза в режиме реального времени, позволяющий на основе раздельного или совместного учета интенсивности хемилюминесценции лейкоцитов и биолюминесценции бактериальных клеток-мишеней получать представление о функциональном состоянии и киллерной активности фагоцитов.

Для реализации данного способа разработан опытный образец двулучевого биохемилюминометра, конструкция кюветного отделения которого позволяет проводить одновременное кинетическое измерение интенсивности свечения смесей "бактерии: фагоциты" в двух параллельных пробах или в одной пробе при двух длинах волн (425 нм и 495 нм), соответствующих максимумам эмиссии люминола и рекомбинантных люминесцирующих микроорганизмов.