Наноразмерные метки для специфического маркирования молекул и клеток микроорганизмов при проведении атомно-силовой микроскопии
Договор № НК 13-04-97054\14 от 08.04.2014 г. и соглашение № 13-04-97054 от 14.05.2014 г.
Руководитель проекта: к.ф.-м.н., доцент Никиян А.Н.
Проект направлен на решение фундаментальной научной проблемы, связанной с идентификацией молекул и клеток в биологических смесях сложного компонентного состава.
Конкретной фундаментальной задачей проекта является идентификация молекул и клеток с использованием наноразмерных меток на основе углерода и металлов при проведении атомно-силовой микроскопии.
Целью работы является разработка оригинального метода идентификации молекул и клеток с использованием наноразмерных меток на основе углерода и металлов при проведении атомно-силовой микроскопии.
В результате выполнения проекта методом атомно-силовой микроскопии проведена визуализация и количественная морфометрия молекул антигена, золотых наночастиц, калиброванных по размеру, аморфного углерода, а также конъюгатов "протеин А-коллоидное золото" и "протеин G-аморфный углерод".
Сформированы и изучены специфические комплексы с участием коллоидного золота и аморфного углерода на подложках для иммуноферментных реакций и на поверхности модельных микроорганизмов. В модели in vitro определены условия насыщения комплексов и установлены оптимальные соотношения взаимодействующих компонентов реакции антиген — антитело. Отработаны приемы и подходы к формированию единичных молекулярных комплексов "антиген — антитело — наноразмерная метка" с использованием антигена, адсорбированного на поверхности иммунологического планшета.
В модели in vivo на поверхности бактериальных клеток Staphylococcus aureus сформированы специфические комплексы с участием коллоидного золота (IgG-Au) и аморфного углерода (IgG-C) и установлены их размерные характеристики и морфологическая организация. Проведена идентификация микроорганизмов в модельных двухкомпонентных биологических системах и разработаны подходы к маркированию бактериальных клеток в сложных биологических смесях для направленного их выделения и последующего изучения.
Получены фундаментальные знания об использовании возможностей атомно-силовой микроскопии для оценки компонентов сложных бактериальных сообществ, их последующего выделения и исследования, что отвечает современным тенденциям перехода от методов, ориентированных на анализ популяции клеток, к "микробиологии единичной клетки".
Последнее обновление: 12.01.2015
Ответственный за информацию:
Лисицкий Иван Иванович, помощник проректора по научной работе
(тел.91-22-07)
