Оренбургский государственный университет

Исследование молекулярных и клеточных механизмов естественного (врожденного) иммунитета

с использованием бактериальных люминесцирующих тест-систем

Проект № 11-04-97-064 р_поволжье_а
Руководитель — д.м.н., профессор Дерябин Д.Г.

При проведении работ в данном направлении разработана серия сенсорных люминесцирующих микроорганизмов с различным строением поверхностных клеточных структур, эффективно экспрессирующих идентичную кассету luxAB генов природного морского люминесцирующего микроорганизма Photobacterium leiognathi. Полученные генетические конструкции депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ГосНИИгенетика, Москва, Россия). С использованием созданных сенсорных микроорганизмов охарактеризованы зависимости люминесцентного отклика при воздействии молекулярных факторов естественного (врожденного) иммунитета, позволившие констатировать существование двух различных и, в известной степени, альтернативных бактерицидных систем, определяющих выраженность ингибирующего эффекта сыворотки крови на уровень свечения E. coli lux+ и B. subtilis lux+ и связанных с преимущественной активностью системы комплемента и лизоцима в отношении грамотрицательных, а бета-лизина (тромоцитарного катионного белка) в отношении грамположительных микроорганизмов.

Полученные результаты явились экспериментальным обоснованием для разработки оригинальной биолюминесцентной технологии оценки входящих в систему естественного (врожденного) иммунитета молекулярных бактерицидных систем. При этом основу данной технологии составило использование оригинальных люминесцирующих штаммов, особенности строения поверхностных структур каждого из которых позволяют относительно специфично оценивать состоятельность определенной молекулярной системы. В свою очередь единым принципом данной технологии стала количественная оценка подавления свечения бактериальных клеток-мишеней, отражающего выраженность развивающегося в подобных условиях бактерицидного эффекта.